Какие методы используются для секвенирования нуклеиновых кислот?

Существует несколько методов для секвенирования нуклеиновых кислот, которые позволяют определить последовательность нуклеотидов в ДНК или РНК. Некоторые из основных методов включают:

1. Метод Сэнгера (дидеоксинуклеотидная цепь): Этот метод основан на использовании дидеоксинуклеотидов, которые приводят к прерыванию цепи при синтезе ДНК. Путем комбинирования дидеоксинуклеотидов с нормальными нуклеотидами и мечением их флуорофорами, можно синтезировать короткие фрагменты ДНК различных длин. Затем фрагменты разделяются по размеру с помощью электрофореза, и последовательность определяется по порядку флуорофорных меток.

2. Пирозеквенирование: Этот метод основан на измерении высвобождаемой при инкорпорации нуклеотидов пирофосфата. При добавлении одного нуклеотида в реакцию, если он соответствует следующему нуклеотиду в цепи, то пирофосфат высвобождается и измеряется. Этот метод позволяет секвенировать более длинные фрагменты ДНК или РНК по сравнению с методом Сэнгера.

3. Секвенирование нового поколения (NGS): Это совокупность методов, которые позволяют параллельно секвенировать миллионы фрагментов ДНК или РНК. NGS-технологии, такие как иллюминирование, пирозеквенирование на платформе Ion Torrent или секвенирование одиночных молекул, используются для быстрого и высокоэффективного секвенирования геномов.

4. Секвенирование по методу Нанопоры: Этот метод использует нанопоры, которые позволяют проходить отдельным нуклеотидам через них. Когда нуклеотид проходит через нанопору, он вызывает изменение электрического сигнала, которое может быть записано и интерпретировано для определения последовательности.

Это только некоторые из методов секвенирования нуклеиновых кислот, которые существуют на сегодняшний день. Стремительное развитие технологий секвенирования позволяет нам получать все более точные и быстрые результаты, что имеет огромное значение для исследований в области геномики и биологии.