Разница между клонированием генов и ПЦР

| 10 октября, 2021 | Биология

Главное отличие

Основное различие между клонированием гена и ПЦР заключается в том, что клонирование гена — это метод, с помощью которого желаемая ДНК или ген могут быть получены in vivo путем формирования рДНК (рекомбинантной ДНК), тогда как ПЦР — это метод, в котором амплификация ДНК выполняется invitro путем повторения циклов цепочки. разделение и полимеризация.

Клонирование гена против ПЦР

Формирование множества копий ДНК из одной желаемой называется пролиферацией ДНК или амплификацией ДНК. Следующие два метода обычно используются для амплификации ДНК, т. Е. Клонирование генов и ПЦР или полимеразная цепная реакция. Эти два продукта представляют собой биотехнологические продукты, которые играют важную роль в понимании болезней. С помощью этих молекулярных методов ученый может делать все больше и больше копий желаемой ДНК. Клонирование генов — это метод, с помощью которого желаемая ДНК или интересующий ген могут быть получены in vivo (в организме) путем формирования рДНК (рекомбинантной ДНК, молекулы ДНК, которая несет генетический материал из нескольких источников). С другой стороны, ПЦР, обозначающая полимеразную цепную реакцию, представляет собой метод, с помощью которого ДНК амплифицируется in vitro (в пробирке, а не в живом организме) путем повторяющихся циклов разделения стенда и полимеризации без использования рДНК. Для клонирования гена для амплификации требуется большое количество ДНК, т.е. по крайней мере микрограмм, тогда как в ПЦР для амплификации достаточно только нанограмма ДНК. Более того, для клонирования генов требуются бактериальные клетки, ДНК-лигаза, векторная ДНК и рестрикционные ферменты. С другой стороны, в методике ПЦР требуются термостабильная ДНК-полимераза, нуклеотиды ДНК и праймеры РНК, а также сегмент ДНК. Клонирование генов — трудоемкий процесс и имеет больше возможностей для ошибок, в то время как ПЦР не требует больших затрат труда и имеет меньшую вероятность ошибок. для амплификации требуется большое количество ДНК, т.е. по крайней мере микрограмм, тогда как в ПЦР для амплификации достаточно только нанограмма ДНК. Более того, для клонирования генов требуются бактериальные клетки, ДНК-лигаза, векторная ДНК и рестрикционные ферменты. С другой стороны, в методике ПЦР требуются термостабильная ДНК-полимераза, нуклеотиды ДНК и праймеры РНК, а также сегмент ДНК. Клонирование генов — трудоемкий процесс и имеет больше возможностей для ошибок, в то время как ПЦР не требует больших затрат труда и имеет меньшую вероятность ошибок. для амплификации требуется большое количество ДНК, т.е. по крайней мере микрограмм, тогда как в ПЦР для амплификации достаточно только нанограмма ДНК. Более того, для клонирования генов требуются бактериальные клетки, ДНК-лигаза, векторная ДНК и рестрикционные ферменты. С другой стороны, в методике ПЦР требуются термостабильная ДНК-полимераза, нуклеотиды ДНК и праймеры РНК, а также сегмент ДНК. Клонирование генов — трудоемкий процесс и имеет больше возможностей для ошибок, в то время как ПЦР не требует больших затрат труда и имеет меньшую вероятность ошибок. праймеры РНК вместе с сегментом ДНК необходимы в методике ПЦР. Клонирование генов — трудоемкий процесс и имеет больше возможностей для ошибок, в то время как ПЦР не требует больших затрат труда и имеет меньшую вероятность ошибок. праймеры РНК вместе с сегментом ДНК необходимы в методике ПЦР. Клонирование генов — трудоемкий процесс и имеет больше возможностей для ошибок, в то время как ПЦР не требует больших затрат труда и имеет меньшую вероятность ошибок.

Сравнительная таблица

Клонирование гена ПЦР
Метод амплификации ДНК, при котором требуемая ДНК может быть получена in vivo путем образования рДНК (рекомбинантной ДНК) и введения ее в бактерии, известен как клонирование генов. Методика амплификации ДНК, при которой требуемая ДНК может быть получена in vitro путем повторяющихся циклов разделения стенда и полимеризации, известна как ПЦР или полимеразная цепная реакция.
История
В 1800-х годах Ханс Дриш был первым, кто клонировал животных. В 1983 году Кэри Маллис изобрела метод ПЦР.
Использование рекомбинантной ДНК
Рекомбинантная ДНК используется при клонировании генов. В ПЦР нет необходимости в рДНК.
Требуемое количество ДНК
Для клонирования гена для амплификации требуется большее количество ДНК, т.е. по крайней мере микрограмм. В ПЦР для амплификации достаточно нанограмма ДНК.
Требования
Для клонирования генов необходимы бактериальные клетки, ДНК-лигаза, векторная ДНК и рестрикционные ферменты. Термостабильная ДНК-полимераза, нуклеотиды ДНК и праймеры РНК вместе с сегментом ДНК необходимы в методике ПЦР.
Скрининг
При клонировании генов амплифицированная ДНК должна быть проверена на последнем этапе, чтобы получить желаемую ДНК. Если до начала реакции ДНК чистая, скрининг с помощью ПЦР не требуется.
Требуемое время
Клонирование гена занимает от 2 до 4 дней для эксперимента. В ПЦР для эксперимента достаточно 4 часов.
Автоматизация
Нет необходимости в автоматизации. Автоматизация — необходимость в ПЦР.
Потребность в труде
Клонирование генов — трудоемкий процесс. ПЦР не требует больших трудозатрат.
Возможность ошибки
У него больше возможностей для ошибок. У него меньше вероятность ошибок.
Использует
ДНК, амплифицированная посредством клонирования генов, имеет ограниченное применение. ДНК, амплифицированная с помощью ПЦР, может использоваться для нескольких целей из-за меньшей вероятности ошибок.

Что такое клонирование генов ?

Клонирование гена — это процесс, с помощью которого мы можем получить несколько копий требуемого гена или части ДНК in vivo, образуя рДНК (рекомбинантную ДНК) .В 1800-х годах Ханс Дриш был первым, кто клонировал животных, разделив эмбрион морского ежа. Чтобы амплифицировать ДНК посредством клонирования генов, сначала из организма выделяют ДНК, которая содержит все гены организма. Затем требуемый ген разрезают до нужного размера с помощью рестрикционных ферментов. Те же рестрикционные ферменты используются для разрезания плазмидной или векторной ДНК (самореплицирующейся молекулы-носителя). Затем требуемый ген или ДНК смешивают с плазмидой. Плазмида и необходимая ДНК прикрепляются друг к другу с помощью ДНК-лигазы. Эта рекомбинантная плазмида затем вставляется в бактерии посредством процесса, известного как трансформация. Затем эти бактерии воспроизводятся снова и снова и вместе с репликацией плазмиды образуют множество копий необходимой ДНК.

Что такое ПЦР ?

ПЦР расшифровывается как «полимеразная цепная реакция». Это циклическая реакция invitro, которая также используется для амплификации ДНК. Кэри Муллис была первой, кто изобрел технику ПЦР в 1983 году и получил Нобелевскую премию в 1993 году. Для ПЦР требуется термостабильная ДНК-полимераза, например, полимераза Taq, поскольку во время этого процесса температура постоянно меняется. Кроме того, необходимы РНК-праймеры, сконструированные в соответствии с требуемым сегментом ДНК и свободными нуклеотидами ДНК. В присутствии всего этого циклическая полимеразная реакция повторяется снова и снова, чтобы сформировать многочисленные копии необходимой ДНК in vitro (в пробирках в лаборатории).

Ключевые отличия

  1. Метод амплификации ДНК, при котором требуемая ДНК может быть получена in vivo путем формирования рДНК (рекомбинантной ДНК) и введения ее в бактерии, известен как клонирование генов, тогда как метод амплификации ДНК, при котором требуемая ДНК может быть получена in vitro с помощью повторяющихся циклов. Разделение стенда и полимеризация известна как ПЦР или полимеразная цепная реакция.
  2. В 1800-х годах Ханс Дриш был первым, кто клонировал животных, с другой стороны, в 1983 году Кэри Маллис изобрела метод ПЦР.
  3. Рекомбинантная ДНК используется при клонировании генов. И наоборот, в ПЦР нет необходимости в рДНК.
  4. Для клонирования гена требуется большее количество ДНК для амплификации, т.е., по крайней мере, микрограмм с другой стороны, только нанограмма ДНК достаточно в ПЦР для амплификации.
  5. Для клонирования генов необходимы бактериальные клетки, ДНК-лигаза, векторная ДНК и рестрикционные ферменты. С другой стороны, в методике ПЦР требуются термостабильная ДНК-полимераза, нуклеотиды ДНК и праймеры РНК, а также сегмент ДНК.
  6. При клонировании гена амплифицированная ДНК должна быть подвергнута скринингу на последнем этапе, чтобы получить желаемую ДНК, в то время как, если ДНК чистая до начала реакции, то нет необходимости в скрининге в ПЦР.
  7. Клонирование гена занимает от 2 до 4 дней для эксперимента; с другой стороны, для эксперимента в ПЦР достаточно 4 часов.
  8. При клонировании генов нет необходимости в автоматизации, тогда как автоматизация необходима в ПЦР.
  9. Клонирование генов — это трудоемкий процесс, с другой стороны; ПЦР не требует больших трудозатрат.
  10. Клонирование генов имеет больше возможностей для ошибок; с другой стороны, вероятность ошибок в PCR меньше.
  11. ДНК, амплифицированная посредством клонирования генов, имеет ограниченное применение, в то время как ДНК, амплифицированная с помощью ПЦР, может использоваться для нескольких целей из-за меньшей вероятности ошибок.

Заключение

Вышеупомянутое обсуждение резюмирует, что и клонирование гена, и ПЦР являются важными методами, которые используются для амплификации ДНК. Клонирование генов — это in vivo (происходит в организме), процесс занимает много времени с большим количеством вероятностей ошибки, тогда как ПЦР — это in vitro (в пробирке в лабораториях), быстрый процесс с меньшими возможностями ошибки.